慢病毒包装
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     欢迎来到江西璟杰生物科技有限公司,我们拥有完善的8大技术服务平台:医学课题研究、病毒包装、病理学检测、分子生物学检测、动物实验、细胞实验、抗体蛋白工程、酵母双杂交。


病毒包装研究:  

(1)基因过表达慢病毒包装

(2)干扰慢病毒包装

(3)RNAi质粒载体构建服务

(4)基于慢病毒载体的miRNA载体构建服务


(1)RNAi质粒载体构建服务

简介

本公司提供先进siRNA设计软件为务。公司还为客户提供包括shRNA质粒表达载体构建、shRNA病毒表达载体(包括可诱导系统)、RNAi阴性对照、RNAi阳性对照等。

服务流程

1、服务的可行性和技术路线。

2. 签订技术服务合同,商定服务收费、任务期限,客户需要预付实验总费用的50%-70%作为实验预付款。

3. 实验结束,按合同内容交付结果。

实验流程

1. shRNA表达载体的选用:客户可以根据实验的需要选用不同的质粒载体,质粒载体的差异在于启动子、标记基因和抗性基因的不同。

2. 设计RNAi靶序列  

3. shRNA质粒载体构建:合成模板、双酶切shRNA空载体、连接与转化、测序鉴定、质粒制备及定量。  

4. 提供实验结果: 质粒、甘油菌、测序结果等。

如需要详细的载体信息或其他技术问题请咨询公司技术部门。


(2)基因过表达和慢病毒构建包装纯化

本来基因表达是受到各种内外信号的精确调控的,一旦这种调控机制的任何一个环节出现问题就会失控。基因的表达过程就可能进入失控状态,就有可能表现为表达过度,即该基因被过度的转录、翻译,最终基因表达产物超过正常水平。

服务流程

1、务的可行性和技术路线。

2. 签订技术服务合同,商定服务收费、任务期限等,客户需要预付实验总费用的70%作为实验预付款。

3. 实验结束,按合同内容交付结果。

实验流程

1. 根据目的基因相关信息(序列,基因序列号等)获取目的基因;

2. 选择符合实验要求的载体;

3. 将目的基因构建到慢病毒载体获得含有目的基因的重组载体;

4. 对于测序正确的重组质粒,提取和纯化高质量(不含内毒素)的重组质粒;

5. 使用高效重组载体和慢病毒包装质粒共转染293T 细胞,进行病毒包装并收集上清液;

6. 通过超滤和超速离心浓缩和纯化病毒;

7. 使用病毒液感染293T细胞,测定病毒滴度。

客户需知

1. 提供与本实验相关的详细资料(含课题基本情况及预期达到的目的等);

2. 提供目的基因RefSeq ID;

3. 目的基因的表达克隆及相关信息;

4. 目的基因抗体及抗体使用说明书(如委托本中心的实验中涉及Western Blot实验);

5. 目的细胞及相关说明(如委托本中心的实验中涉及目的细胞的培养)。

结果交付

1. 目的基因慢病毒质粒测序文件,测序图谱,质粒结构图,序列比对文件;

2. 目的基因慢病毒质粒构建、包装、纯化实验报告;

3. 病毒滴度检测报告(病毒滴度 ≥1 X 108 TU/ml);

4. 功能检测的相关实验报告。

 

(3)基于慢病毒载体的miRNA载体构建服务

简介

miRNA是一种21-25nt长的单链小分子RNA, 是由具有发夹结构的约70-90个碱基大小的单链RNA前体经过Dicer酶加工后生成,miRNA具有高度的保守性、时序性和组织特异性.而且这种特异性和时序性,决定了组织和细胞的功能特异性,表明miRNA在细胞生长和发育过程的调节过程中起多种作用,因此miRNA的研究受到了生物学家的广泛关注。 
本公司可以将客户研究的miRNA构建到慢病毒载体,生产的病毒颗粒可以直接用于感染细胞或者动物实验。可以选择将Pri-miRNA或者PremiRNA构建到载体,构建中也可以根据实验需要选用不同的Flank.

特点

1.可以稳定长期的表达miRNA,可以用于筛选稳定细胞模型用于长期的研究和观察。

2.感染效率高而且可以感染绝大部分细胞种类。

3.可以直接用于动物实验或者感染细胞后回输到动物体内。

服务流程

1、服务的可行性和技术路线。 
2. 签订技术服务合同,商定服务收费、任务期限等,客户需要预付实验总费用的70%作为实验预付款。 
3. 实验结束,按合同内容交付结果。

结果交付

1.目的基因慢病毒质粒测序文件,测序图谱,质粒结构图,序列比对文件

2.目的基因慢病毒质粒构建、包装、纯化实验报告

3.病毒滴度检测报告(病毒滴度 ≥1 X 108 TU/ml)

4.功能检测的相关实验报告


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